ກ້ອງຈຸລະທັດ Fluorescence: ຫຼັກການພື້ນຖານຂອງວິທີການທີ່

ການດູດຊຶມແລະ Re: ການປ່ອຍອາຍພິດຂອງນ້ໍາອະນົງຄະທາດແລະປອດສານພິດເພີ່ມເຕີມແສງສະຫວ່າງແມ່ນຜົນມາຈາກ phosphorescence ຫຼື fluorescence ໄດ້. ຄວາມແຕກຕ່າງລະຫວ່າງປະກົດການແມ່ນໄລຍະເວລາຂອງໄລຍະຫ່າງລະຫວ່າງການດູດຊຶມແລະການປ່ອຍອາຍພິດຂອງ flux ແສງສະຫວ່າງໄດ້. ໃນເວລາທີ່ແສງຂອງຂະບວນການເຫຼົ່ານີ້ເກີດຂຶ້ນເກືອບພ້ອມໆກັນ, ໃນຂະນະທີ່ phosphorescence - ມີຄວາມຊັກຊ້າບາງ.

ຂໍ້ມູນປະຫວັດສາດ

ໃນປີ 1852, ວິທະຍາສາດອັງກິດ Stokes, ຄັ້ງທໍາອິດທີ່ອະທິບາຍ fluorescence. ໄດ້ນໍາສະເຫນີໃນໄລຍະໃຫມ່ເປັນຜົນມາຈາກການທົດລອງທີ່ມີ fluorspar, ເຊິ່ງ emit ແສງສີແດງພາຍໃຕ້ແສງສະຫວ່າງ ultraviolet. Stokes ໄດ້ຍົກໃຫ້ເຫັນປະກົດການທີ່ຫນ້າສົນໃຈ. ມັນໄດ້ຖືກພົບເຫັນວ່າຄວາມຍາວຄື່ນຂອງ radiation fluorescent ແມ່ນສະເຫມີໄປຫຼາຍກ່ວາການໄຫຼຂອງແສງສະຫວ່າງທີ່ຫນ້າຕື່ນເຕັ້ນໄດ້.

ເພື່ອຢືນຢັນການສົມມຸດຕິຖານໃນສະຕະວັດທີ 19 ໄດ້ມີການທົດລອງຈໍານວນຫຼາຍ. ພວກເຂົາເຈົ້າສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າແນວພັນຂອງຕົວຢ່າງໂລດພາຍໃຕ້ອິດທິພົນຂອງແສງສະຫວ່າງ ultraviolet ໄດ້. ໃນບັນດາອຸປະກອນການ, ໃນບັນດາສິ່ງອື່ນໆ, ການໄປເຊຍກັນ, ຢາງໃສ, ແຮ່ທາດ, chlorophyll, ຢາເສບຕິດມັນດິບທາດປະສົມອະນົງຄະທາດ, ວິຕາມິນ, ນ້ໍາມັນ. ການນໍາໃຊ້ໂດຍກົງຂອງສີຍ້ອມສໍາລັບການທົດສອບທາງຊີວະພາບໄດ້ເລີ່ມຕົ້ນພຽງແຕ່ໃນປີ 1930

ກ້ອງຈຸລະທັດ Fluorescence: ຄໍາອະທິບາຍ

ບາງສ່ວນຂອງອຸປະກອນທີ່ນໍາໃຊ້ໃນເຄິ່ງທໍາອິດຂອງການສຶກສາຕະວັດທີ 20 ສະແດງສະເພາະສູງ. стал важнейшим инструментом и в биомедицинских, и в биологических исследованиях. ຂໍຂອບໃຈກັບປະສິດທິພາບ, ເຊິ່ງບໍ່ສາມາດບັນລຸໄດ້ໂດຍທາງກົງກັນຂ້າມວິທີການ, ວິທີການຂອງກ້ອງຈຸລະທັດ fluorescence ໄດ້ກາຍເປັນເຄື່ອງມືທີ່ສໍາຄັນໃນການຄົ້ນຄວ້າຊີວະການແພດແລະຊີວະພາບ. ເທົ່າທຽມກັນຜົນທີ່ສໍາຄັນໄດ້ຮັບ, ແລະສໍາລັບການອຸປະກອນ.

? ຂໍ້ດີຈະເປັນແນວໃດວິທີການຂອງກ້ອງຈຸລະທັດ fluorescence ແນວໃດ? ການນໍາໃຊ້ອຸປະກອນໃຫມ່ໄດ້ກາຍເປັນທີ່ເປັນໄປໄດ້ແລະການຄັດເລືອກຂອງອົງປະກອບ submicroscopic ສັບມືຖືສະເພາະໃດຫນຶ່ງທີ່ສູງໄດ້. ກ້ອງຈຸລະທັດ Fluorescence ສາມາດກວດສອບໂມເລກຸນດຽວ. ຊະນິດຂອງສີຍ້ອມອະນຸຍາດໃຫ້ການກໍານົດລາຍການທີ່ຫຼາກຫຼາຍໃນເວລາດຽວ. ເຖິງວ່າຈະມີການແກ້ໄຂທາງກວ້າງຂອງພື້ນທີ່ຈໍາກັດຂອງວົງ diffraction ຂອງອຸປະກອນ, ເຊິ່ງ, ແລະເຮັດໃຫ້ການ, ຂຶ້ນຢູ່ກັບຄຸນສົມບັດສະເພາະໃດຫນຶ່ງຂອງຕົວຢ່າງ, ການກໍານົດຂອງໂມເລກຸນຕ່ໍາກວ່າລະດັບນີ້ກໍເປັນໄປໄດ້ທີ່ຂ້ອນຂ້າງ. ຕົວຢ່າງຕ່າງໆຫຼັງຈາກ irradiation ສະແດງ autofluorescence. ປະກົດການນີ້ຖືກນໍາໃຊ້ຢ່າງກວ້າງຂວາງໃນ Petrology, botany, ອຸດສາຫະກໍາເຊມິຄອນດັກໄດ້.

ຄຸນນະສົມບັດ

ສຶກສາແພຈຸລັງສັດຫຼືເຊື້ອພະຍາດມັກຈະຊັບຊ້ອນຫຼືອ່ອນແອເກີນໄປຫຼືທີ່ເຂັ້ມແຂງທີ່ສຸດ autofluorescence Unspecifed. ຢ່າງໃດກໍຕາມ, ມູນຄ່າໃນການສຶກສາ acquires ແນະນໍາເຂົ້າໄປໃນອົງປະກອບອຸປະກອນການຕື່ນເຕັ້ນໃນຄວາມຍາວຄື່ນສະເພາະໃດຫນຶ່ງແລະ emitting ຄວາມເຂັ້ມໄຫຼແສງສະຫວ່າງມີຄວາມຈໍາເປັນ. Fluorochromes ປະຕິບັດເປັນສີຍ້ອມສາມາດເປັນອິດສະຫຼະທີ່ຂຶ້ນກັບໂຄງສ້າງ (ສັງເກດເຫັນຫຼືເບິ່ງເຫັນ). ດັ່ງນັ້ນພວກເຂົາມີການຄັດສັນສູງເພື່ອເປົ້າຫມາຍດັ່ງກ່າວ, ແລະຜົນຜະລິດ quantum.

стала широко применяться с появлением естественных и синтетических красителей. ກ້ອງຈຸລະທັດ Fluorescence ໄດ້ຖືກນໍາໃຊ້ຢ່າງກວ້າງຂວາງນັບຕັ້ງແຕ່ການມາເຖິງຂອງສີຍ້ອມທໍາມະຊາດແລະສັງເຄາະ. ພວກເຂົາເຈົ້າໄດ້ possessed ໂປຣໄຟລ໌ຄວາມຫນາແຫນ້ນທີ່ແນ່ນອນຂອງການປ່ອຍອາຍພິດແລະກະຕຸ້ນແລະເປົ້າຫມາຍທີ່ຈະບັນລຸເປົ້າຫມາຍທາງຊີວະພາບສະເພາະໃດຫນຶ່ງ.

ຂໍມູນກ່ຽວກັບໂມເລກຸນຂອງບຸກຄົນ

ປົກກະຕິແລ້ວ, ໃນສະພາບການທີ່ເຫມາະສົມ, ທ່ານສາມາດລົງທະບຽນເປັນສະຫມີອົງປະກອບທີ່ແຍກຕ່າງຫາກ. ສໍາລັບດັ່ງກ່າວນີ້, ໃນບັນດາສິ່ງອື່ນໆ, ມັນເປັນສິ່ງຈໍາເປັນເພື່ອສະຫນອງສຽງຕ່ໍາພຽງພໍຂອງເຄື່ອງກວດຈັບແລະຄວາມເປັນມາແສງ. ໂມເລກຸນ fluorescein ກັບຄວາມລົ້ມເຫຼວເນື່ອງຈາກ photobleaching ສາມາດ emit ເຖິງ 300 ພັນ. photons. ໃນປະສິດທິພາບການເກັບກໍາ 20% ຂອງຂະບວນການແລະສາມາດລົງທະບຽນໃຫ້ເຂົາເຈົ້າໃນຈໍານວນປະມານ 60 ພັນເປັນ.

, основанная на лавинных фотодиодах или электронном умножении, позволяла исследователям наблюдать поведение отдельных молекул на протяжении секунд, а в ряде случаев и минут. ກ້ອງຈຸລະທັດ Fluorescence ອີງໃສ່ Photodiodes avalanche ເປັນຫຼືຫຼາຍເອເລັກໂຕຣນິກ, ອະນຸຍາດໃຫ້ຄົ້ນຄ້ວາໃນການສັງເກດເບິ່ງພຶດຕິກໍາຂອງ molecules ບຸກຄົນໂດຍຜ່ານການຄັ້ງທີສອງ, ແລະໃນບາງກໍລະນີເຖິງແມ່ນວ່ານາທີ.

ຄວາມສັບສົນ

A ບັນຫາທີ່ສໍາຄັນໃນຄວາມໂປດປານຂອງສະກັດກັ້ນການພື້ນຖານສຽງ optical ໄດ້. ເນື່ອງຈາກຄວາມຈິງທີ່ວ່າມີຫຼາຍຂອງອຸປະກອນທີ່ນໍາໃຊ້ໃນການອອກແບບຂອງການກັ່ນຕອງແລະທັດສະນະທີ່ສະແດງ autofluorescence ບາງ, ຄວາມພະຍາຍາມຂອງວິທະຍາສາດໃນໄລຍະຕົ້ນໄດ້ຖືກຮັດກຸມເພື່ອການຜະລິດຂອງອົງປະກອບມີແສງຕ່ໍາໄດ້. ຢ່າງໃດກໍຕາມ, ການທົດລອງຕໍ່ມາຫຼັງຈາກໄດ້ເຮັດໃຫ້ບົດສະຫຼຸບໃຫມ່. , основанная на полном внутреннем отражении, позволяет достичь низкого фона и высокоинтенсивного возбуждающего светового потока. ໂດຍສະເພາະ, ໄດ້ພົບເຫັນວ່າກ້ອງຈຸລະທັດ fluorescence, ໂດຍອີງໃສ່ການສະທ້ອນພາຍໃນທັງຫມົດ, ມັນອະນຸຍາດໃຫ້ເພື່ອໃຫ້ບັນລຸຄວາມເປັນມາຕ່ໍາແລະແສງສະຫວ່າງກະຕຸ້ນຄວາມຫນາແຫນ້ນສູງ.

ກົນໄກ

, основанной на полном внутреннем отражении, заключаются в использовании быстрозатухающей или нераспространяющейся волны. ຫຼັກການພື້ນຖານຂອງກ້ອງຈຸລະທັດ fluorescence, ໂດຍອີງໃສ່ການສະທ້ອນພາຍໃນທັງຫມົດແມ່ນນໍາໃຊ້ຄື້ນຫາຍຫຼືຫາຍໄດ້. ມັນເກີດຂຶ້ນຢູ່ຊາຍແດນລະຫວ່າງສື່ມວນຊົນກັບທີ່ແຕກຕ່າງກັນທີ່ ດັດສະນີ refractive. ໃນກໍລະນີດັ່ງກ່າວນີ້, ໄດ້ beam ແສງສະຫວ່າງຜ່ານ prism ໄດ້. ມັນມີພາລາມິເຕີດັດຊະນີ refractive ສູງ.

ການຊຶມຢູ່ໃກ້ຊິດກັບການແກ້ໄຂມີນ້ໍາຫຼືແກ້ວທີ່ມີພາລາມິເຕີທີ່ຕ່ໍາ. ຖ້າຫາກວ່າ beam ຂອງແສງສະຫວ່າງກໍາກັບຢູ່ມັນຢູ່ມຸມທີ່ເປັນສິ່ງສໍາຄັນຫຼາຍທີ່ເປັນ, beam ໄດ້ຖືກສະທ້ອນໃຫ້ເຫັນທັງຫມົດຈາກການໂຕ້ຕອບຂອງ. ປະກົດການດັ່ງກ່າວນີ້, ແລະເຮັດໃຫ້ການ, ຈະເຮັດໃຫ້ຄື້ນຟອງ nonpropagating. ໃນຄໍາສັບຕ່າງໆອື່ນໆ, ພາກສະຫນາມໄຟຟ້າໄດ້ສ້າງເຊິ່ງ penetrates ເຂົ້າໄປໃນຂະຫນາດກາງທີ່ມີພາລາມິເຕີດັດຊະນີ refractive ຕ່ໍາໄປໄລຍະຫນຶ່ງຫນ້ອຍກ່ວາ 200 nanometers ໄດ້.

ຄື້ນຫາຍ ຄວາມຫນາແຫນ້ນຂອງແສງສະຫວ່າງ ຈະເປັນພຽງພໍທີ່ຈະກະຕຸ້ນ fluorophores. ຢ່າງໃດກໍຕາມ, ເນື່ອງຈາກວ່າຄວາມເລິກຂະຫນາດນ້ອຍສຸດຂອງຕົນ, ປະລິມານຂອງມັນຈະມີຂະຫນາດນ້ອຍຫຼາຍ. ຜົນໄດ້ຮັບແມ່ນເປັນພື້ນຖານໃນລະດັບຕ່ໍາ.

ການແກ້ໄຂ

ກ້ອງຈຸລະທັດ Fluorescence ແມ່ນອີງໃສ່ການສະທ້ອນພາຍໃນທັງຫມົດ, ສາມາດຕິບັດທີ່ມີ epi-illumination. ນີ້ຮຽກຮ້ອງໃຫ້ມີທັດສະນະທີ່ມີຮູຮັບແສງຈໍານວນຫລາຍສູງ (ຢ່າງຫນ້ອຍ 14, ແຕ່ມັນເປັນຄວາມປາຖະຫນາໃຫ້ບັນລຸມັນ 1.45-1.6), ແລະ illuminated ບາງສ່ວນອຸປະກອນພາກສະຫນາມ. ສຸດທ້າຍແມ່ນບັນລຸໄດ້ມີຂະຫນາດຈຸດຂະຫນາດນ້ອຍ. ສໍາລັບເອກະພາບຫຼາຍກວ່າເກົ່າໂດຍໃຊ້ແຫວນບາງ, ເຊິ່ງໄດ້ຖືກສະກັດໂດຍບາງສ່ວນຂອງນ້ໍາໄດ້. ສໍາລັບມຸມທີ່ສໍາຄັນ, ຫຼັງຈາກທີ່ມີສະທ້ອນໃຫ້ເຫັນຈໍານວນທັງຫມົດ, ພວກເຮົາຈໍາເປັນຕ້ອງລະດັບສູງຂອງການຫັກເຫຂອງຂະຫນາດກາງການເອົາໃຈໃສ່ໃນການທັດສະນະແລະກະຈົກຄອບຂອງກ້ອງຈຸລະທັດ.